液相色譜
更新時(shí)間:2012-11-24 點(diǎn)擊次數(shù): 2256次
液相色譜
液相色譜也叫層析法,它是一種能的物理分離技術(shù),將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測(cè)手段,就成為色譜分析法。
液相色譜的zui早應(yīng)用是用于分離植物色素,其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。此時(shí),玻璃管的上端立即出現(xiàn)幾種顏色的混合譜帶。然后用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動(dòng),并逐漸分開成幾個(gè)不同顏色的譜帶,繼續(xù)沖洗就可分別接得各種顏色的色素,并可分別進(jìn)行鑒定。色譜法也由此而得名。 現(xiàn)在的色譜法早已不局限于色素的分離,其方法也早已得到了極大的發(fā)展,但其分離的原理仍然是一樣的。我們?nèi)匀唤兴V分析。 一、色譜分離基本原理: 由以上方法可知,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動(dòng)的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動(dòng)相。 色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。 使用外力使含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。 二、色譜分類方法: 色譜分析法有很多種類,從不同的角度出發(fā)可以有不同的分類方法。 從兩相的狀態(tài)分類: 色譜法中,流動(dòng)相可以是氣體,也可以是液體,由此可分為氣相色譜法(GC)和法(LC)。固定相既可以是固體,也可以是涂在固體上的液體,由此又可將氣相色譜法和法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。 法是繼氣相色譜之后,70年代初期發(fā)展起來的一種以液體做流動(dòng)相的新色譜技術(shù)。 是在氣相色譜和經(jīng)典色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的?,F(xiàn)代和經(jīng)典沒有本質(zhì)的區(qū)別。不同點(diǎn)僅僅是現(xiàn)代比經(jīng)典有較高的效率 和實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化 操作。經(jīng)典的法,流動(dòng)相在常壓下輸送,所用的固定相柱效低,分析周期長(zhǎng)。而現(xiàn)代法引用了氣相色譜的理論,流動(dòng)相改為高壓輸送(zui高輸送壓力可達(dá)4.9?107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典(每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬);同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器,可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)。因此,具有分析速度快、分離效能高、自動(dòng)化等特點(diǎn)。所以人們稱它為高壓、高速、或現(xiàn)代法。